一代神醫(yī)。他樂于治病行醫(yī)，醫(yī)術(shù)高超，堅持孜孜不倦地進取，研制麻沸散、自創(chuàng)五禽戲、開創(chuàng)外科手術(shù)先河，只為更多地減輕患者病痛、強健百姓體魄;他醫(yī)德高尚，游醫(yī)天下，免費為窮苦百姓行醫(yī)治病，深得百姓的尊重與愛戴;身為舉世聞名的神醫(yī)，他視功名于糞土，不把為權(quán)貴看病置于為百姓看病之上，甚至因此得罪當權(quán)者。

譙郡縣縣令之女。與華佗一見鐘情，但是由于父親的阻擾和吳成的故意破壞，兩人分手，明心也被吳成下藥眼睛失明。縣令被人陷害后處死，家道中落的明心陷入悲慘的境地。早已相識的華佗為明心醫(yī)治眼睛進而讓兩人再次互生情愫，之后明心一直陪伴在華佗身邊。

華佗的二師兄。自小與華佗一起學習醫(yī)術(shù)，但是心機深沉為人陰狠，為了達目地他算計師弟、強奪師弟所愛，然后又為逐名利拋棄妻子、好權(quán)謀術(shù)、欺師滅祖，可謂無所不用其極。與華佗一直針鋒相對，想盡辦法打擊陷害華佗。

華佗的大師兄，譙郡縣的醫(yī)官。雖然醫(yī)術(shù)高超，但是愛占小便宜有時還會坑蒙拐騙。他習慣游走于市井，悠哉處事、樂觀混世的生活態(tài)度并不被身邊親朋看好。然而他對率真俏皮的喜蓮一往情深，可以毫無保留地傾盡所有。

俏皮潑辣的萌妹子，“野蠻女友”式人物。一直陪伴在明心身邊。她率真的性格吸引了胡半仙的注意，此后對其愛得一發(fā)不可收拾。最后因卷入曹家內(nèi)斗，喜蓮與胡半仙在刑場結(jié)婚，雙雙下酒后殉情而亡。

東漢末年名將，水軍大都督，孫權(quán)手下得力將領(lǐng)，一心對抗曹操。周瑜患有失眠病，他廣招天下名醫(yī)都沒有醫(yī)治好，而華佗卻手到病除讓他免除多日來失眠的痛苦。周瑜知道華佗想去曹營救治瘟疫，于是想華佗軟禁起來，卻被華佗巧妙逃脫。